2023-02-09
试剂空白:
试剂空白指因测试试剂自身存在,导致测试结果出现很小正误差。由于生化测试所测吸光度是相对吸光度,因此在理论上,一切终点法检测均需减去试剂自身吸光度。试剂自身吸光度即为试剂空白。测量方法为根据正常检测的试剂及样本量将样品用蒸馏水代替进行检测。
检测试剂空白值在一次检测中特别重要,在低浓度测定时应将检测试剂空白值减去检测结果。例如,若将0.06mg/L低浓度试验结果中0.02mg/L试剂空白值减去,则最终测定结果将至少变化30%。但是从高浓度1.23mg/L试验结果中减去0.02mg/L试剂空白值后,最后测定结果仅有2%改变。
确定试剂空白值需采用优质去离子水替代待测样品并添加测试试剂按操作步骤进行常规检测。再将试样测定结果与测试试剂空白值相减。不同批测试试剂的空白值有一定改变,因此在采用不同批测试试剂时需重新检测空白值。
传统的手工方法,每测定一次至少需要制作3根管子,分别是测定管子,标准管子和空白管子。其中空白管为试剂中加入蒸馏水后测量即为试剂空白。由于操作环境,仪器状态和试剂稳定性的变异,需要对试剂空白进行每一次的测定,即实时试剂空白的测定。
全自动分析仪中大体模拟手工操作的情况。但是很多全自动分析仪为了追求快速,设计中都使用了一些折中的方法对试剂空白进行检测。有的全自动分析仪做不到实时试剂空白是因为都是先加样品再加试剂。为折中起见,不得不在定标时作试剂空白保存,需减去试剂空白后才能减去该预存数值。这一作法,就较稳定的试剂而言,其结果几乎没有受到影响。
总体来说,自动生化仪中试剂空白通常以零点吸光度形式出现,这种吸光度由校准来建立。
样本空白:
样品空白就是在一定的测试程序下,以一定的样品浓度为零基准来进行仪器测试。样品空白在添加测试试剂之前,可抵消样品本身所具有的色度或者浊度所带来的正误差。因溶血,脂血和黄疸的存在,可使样品自身吸光度影响检测结果。因此测定样品自身的吸光度(也就是样品空白)就能除去这一方面的干扰。测量方法为根据正常检测的试剂及样本量将试剂改为蒸馏水或者生理盐水。在自动生化仪中,样本空白的定义是困难的。涉及剔除样本空白的内容约为以下几点:
a)。在双试剂测定时,加入试剂1和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法。
b).目前高质量试剂抗干扰能力较好,如某些双试剂中, R1添加后与样品孵育一定时间,使血红蛋白,脂肪,胆红素等发生化学反应,然后添加R2即可开始测定反应。样本空白均能被排除于一定的范围之外。
c)。双波长测定原理是依据干扰组分与待测物质吸收光谱峰形特征选取两种波长与。使得干扰组分的吸光系数在两个波长上都是相等的,同时使得待测物质的吸光系数也存在明显不同。分别用两个波长对分析溶液进行吸光度测定,用两种吸光度值之差(△A)来表示。还可减去部分样本空白。
d)。某些仪器具有特殊的“血清信息”函数设置。作法均为分别占空白通道进行计算,又称样品空白校准。
当利用样品空白来调零测试仪器时,只需测定样品和测试试剂反应所形成的色度。因试样背景色度及浊度常不相同,故试样空白常用来调零仪器。
试剂空白和样品空白的空白概念区别要点:**空白=只含**的空白(吸光度)
3、水是空白的:
比色杯加水后吸光度水空白主要有检查、修正光路系统(例如光源和比色杯)的含义,但也起着消除计算时“杯差”现象的作用。日立7060 Cell Blank(杯空白)所测为水空白。
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